Das Kluyveromyces lactis Killertoxin: Regulatoren des Zellimports und der intrazellulären Wirkung in Saccharomyces cerevisiae

Abstract

Killerstämme der Milchhefe Kluyveromyces lactis sekretieren einen heterotrimeren (αßγ) Toxinkomplex (Zymocin), welcher das Wachstum sensitiver Hefen wie z.B. Saccharomyces cerevisiae inhibiert. Die Zytotoxizität des Zymocins resultiert aus der Endonucleaseaktivität der γ-Untereinheit. Diese spaltet im Zytosol sensitiver Hefezellen tRNAGlu, tRNALys und tRNAGln auf der 3‘-Seite Elongator-abhängig modifizierter Wobble-Uridine (U34) im Anticodonbereich. Im ersten Teil der Arbeit (Publikation 1, 2 und 3) konnten vier neue Binde- bzw Importfaktoren (PMA1, IPT1, UGP1 und ISR1) identifiziert werden, die vermutlich in Ereignisse nach der Zymocinbindung an den Zellwandrezeptor Chitin involviert sind. Im zweiten Teil (Manuskript 1 und 2) steht der evolutionär hochkonservierte Elongator im Mittelpunkt. Der Komplex hat Acetyltransferase-Aktivität und ist essentiell für die Bildung von modifizierten Seitenketten im Anticodon (U34) einiger tRNAs. Die Aktivität des Elongators ist dabei nicht nur von einer vollständigen Assemblierung, sondern auch vom Phosphorylierungsstatus der Elp1-Untereinheit, abhängig. Es konnte gezeigt werden, dass neben der Typ2A-Proteinphosphatase Sit4, auch die Caseinkinase Hrr25 den Elp1-Phosphorylierungsstatus beeinflusst.