Beeinflussung von Migration und Invasion von Ovarialkarzinomzellen durch den Rho-Kinase-Inhibitor Y27632

Abstract

Ziel unserer Arbeit war der Nachweis einer Rho-Kinase-gesteuerten Tumorzellmigration und deren mögliche Inhibition durch Y27632. Dazu führten wir Migrationsassays und Immunfluoreszenzuntersuchungen bei fünf Ovarialkarzinomzelllinien durch. Bei der Einzelzellanalyse der Ovarialkarzinomzelllinien ES2 und SKOV3 zeigte sich nach Inkubation eine signifikante Verringerung der Migrationsgeschwindigkeiten. Parallel dazu ließ sich in Immunfluoreszenzversuchen eine Dislokation der membranständigen Ezrin-Komponente bei Zugabe des ROCK-Inhibitors nachweisen. Im Gegensatz dazu zeigte sich bei OVCAR3, OAW42 und CAOV3 eine Y27632-induzierte Stimulation der Migration, welche mit einer membranären Ezrin-Akkumulation unter Inhibitor-Zugabe einherging. Die vorliegenden Ergebnisse lassen die Schlussfolgerung zu, dass die Migrations- und Metastasierungsaktivität in Ovarialkarzinomzelllinien ebenfalls durch die Phosphorylierung des CD44-ERM–Komplexes und dessen Interaktion mit dem Aktin-Zytoskelett gesteuert wird. Weiterführende Versuchsansätze könnten die quantitative Erforschung der spezifischen Migrationshemmung sein, um Metastasierung und systemische Streuung von Ovarial-karzinomen zu stoppen, respektive primär zu verhindern.

The aim of our study was to prove a Rho kinase controlled migration of tumor cells and its possible inhibition by Y27632. For this purpose, we performed migration assays and immunofluorescence studies in five ovarian carcinoma cell lines. After the incubation a significant reduction in the migration velocities was detected in the single-cell analysis of the ovarian carcinoma cell lines SKOV3 and ES2. Concurrently, immunofluorescence experiments displayed dependencies, namely the dislocation of the membranous Ezrin component caused by the addition of the ROCK inhibitor. In contrast, OVCAR3, OAW42 and CAOV3 showed a Y27632-induced stimulation of the migration accompanied by a membranous accumulation of Ezrin due to the addition of the inhibitor. The present results lead to the conclusion that the migration and metastasis in ovarian carcinoma cell lines is also controlled by the phosphorylation of the CD44-ERM-complex and its interaction with the actin cytoskeleton. Further experimental approaches could include quantitative research of specific migration inhibition to stop respectively prevent metastasis and the systemic spread of ovarian carcinomas.