Synthese und biochemische Parameter zell-impermeabler Cyclosporine

Abstract

Gegenstand der vorliegenden Arbeit ist die Synthese leicht zugänglicher CsA-Derivate ausgehend vom CsA. Diese sollten Cyclophilin-Inhibitoren ohne immunsuppressive Wirkung sein. Desweiteren sollten CsA-Analoga synthetisiert werden, welche die Zellmembran nicht passieren und somit zur selektiven Inhibition extrazellulär vorkommender Cyclophiline geeignet sind. Die synthetisierten Derivaten wurden in bereits evaluierten Assay-Systemen auf ihre biochemischen Eigenschaften in Bezug auf die Inhibition der Peptidyl-Prolyl-cis/trans-Isomerase-Aktivität und der Calcineurin-Phosphatase-Aktivität, dem Vermögen, die Zellmembran zu passieren, sowie im NFAT-Reportergen-Assay vermessen. Einige der in dieser Arbeit enthaltenen Derivate sind potenten Cyclophilin-Inhibitoren mit deutlich herabgesetzten immunsuppressiven Eigenschaften und ohne Inhibition der Calcineurin-Phosphatase-Aktivität und zeigen keine Passage der Zellmembran. Für ausgewählte in dieser Arbeit dargestellte CsA-Analoga erfolgte die Testung in Modellsystemen für praktische Anwendungen.

Subject of this study is the synthesis of easily achievable CsA analogs starting with CsA. These should be inhibitors of cyclophilin without any immunosuppressive action. Furthermore CsA derivatives should be synthesized which do not pass the cell membrane and thus are qualified to selectively inhibit extracellularly occurring cyclophilins. The synthesized derivatives have been tested for their biochemical properties, concerning the inhibition of peptidyl prolyl cis/trans isomerization and calcineurin phosphatase activity, the ability to pass cell membrane, and the NFAT-reporter gen assay, in already evaluated assay-systems. Some of the derivatives shown in this study are potent inhibitors of cyclophilin with distinct reduced immunosuppressed properties and without any inhibition of calcineurin phosphatase activity and they do not pass the cell membrane. Selected CsA analogs shown in this study have been tested in model systems for practical applications.