" Mit vereinten Kräften" - Zusammenspiel von Proteintransportkomplexen der chloroplastidären Hüllmembranen

Abstract

Die überwiegende Mehrheit der Plastidenproteine werden als Vorläuferproteine mittels der Trans¬lokase¬komplexe der äußeren (Toc-Komplex) und der inneren Hüll¬membran (Tic-Komplex) in das Organell transportiert. Im Rahmen dieser Arbeit wurden die dafür zuständigen Proteinkomplexe untersucht. Dies geschah hauptsächlich mit den zentralen Methoden des in organello Protein¬importes und der sich anschließendenden Nativgel¬elektrophorese. Dabei wurde aus¬gehend von der hrCN - Gelelektro¬phorese die Technik der nativen Auftrennung von Proteinkomplexen weiterentwickelt und die HDN-PAGE eingeführt. Die Analysen der (verlangsamten) Importreaktionen zeigen verschiedene distinkte Signalmuster, wobei einige Signale unabhängig von dem Transportsubstrat auftreten, andere eine Substratabhängigkeit zeigen. Die Verifizierung der Signale als Translokations¬intermediate erfolgt u.a. durch eine kombi¬nierte Aufreinigung mittels Hüllmembran¬präparation und 2D-Gelelektrophorese mit anschließender Western-Analyse. Insgesamt wird mit den Ergebnissen dieser Arbeit eine neue methodische Grundlage zur nah-nativen Untersuchung des Proteintransports der chloroplastidären Hüllmembranen zur Verfügung gestellt und das Modell um mannigfaltigere und dynamischere Interaktionen zwischen Toc- und Tic-beinhaltenden Transportkomplexen erweitert.